Név: Antitest sztrippelő oldat
Katalógusszám: L7710A, 500ml * GV0480, 500ml 5X
* Elegendő reagens 3000 cm2 vagy 200-400 membráncsíkhoz vagy 20-40 standard blothoz
• Tárolás: RT-n tárolandó (hosszú tároláshoz: + 4C °) (L)
● Nincs csípős szagú merkaptoetanol. Időt takaríthat meg.
● Az antitestek eltávolítása szobahőmérsékleten történik. Nincs szükség a blotok megmelegítésére Költséges minta megtakarítása
● Az antitesteket szobahőmérsékleten csak körülbelül 15 perc alatt
takaríthatjuk meg.

Western Blot sztrippelő puffer

Blokkoló puffer	Blokkoló ügynök	Fénypontok	Mikor kell használni	Elérhető formátumok
StartingBlock	Szérum és biotinmentes egyszeri tisztított fehérje	Az antitestek és antitest-kombinációk széles skálájával jól teljesít. Kompatibilis a streptavidin rendszerekkel Kevesebb, mint 15 perc alatt blokkol	Legjobb a közepesen magas bőséges fehérjék vagy az erős antitest affinitás esetén Magas háttér az aktuális blokkoló pufferrel Western blotok lecsupaszítása és újrapróbálása	PBS TBS PBST TBST
Blocker FL	Egyetlen tisztított fehérje	Blokkolja a felesleges nem specifikus kötőhelyeket a háttér fluoreszcencia csökkentése érdekében, Működik mind a nitrocellulózzal, mind az alacsony fluoreszcenciájú PVDF-del Mosószermentes 15-30 perc alatt blokkol	Fluoreszcencia western blottolás Száraz fluoreszcens blotok képalkotása és tárolása	10X
Pierce tiszta tej blokkoló puffer	Tisztított és stabilizált tejfehérjék	Nagy teljesítményű házi tej blokkoló pufferek helyettesítése a Western blot alkalmazásokban Hosszú eltarthatóság szobahőmérsékleten	Akkor használja, ha a magas zsírtartalmú tej nem látható Fluoreszcens és kemilumineszcens alkalmazások	Borát, pH 7,6
SuperBlock	Szérum és biotinmentes egyszeri tisztított glikoprotein	A fehérje-alapú készítmény nem tartalmaz immunglobulinokat, albumint vagy endogén biotint, így kompatibilis sok olyan helyzetben, ahol a hagyományos blokkoló szerek kudarcot vallanak. Biotin mentes streptavidin rendszerrel történő alkalmazásra 10 perc alatt blokkol	Magas háttér az aktuális blokkoló pufferrel	PBS TBS PBST TBST
SEA BLOCK blokkoló puffer	Steelhead lazac szérum	Hasznos az emlős mintákat tartalmazó detektálási módszerekben. Különösen hatékony fluoreszcencia képalkotást igénylő alkalmazásokban	Emlősminták Fluoreszcencia western blottolás	PBS
BSA blokkoló	Tisztított szarvasmarha szérum albumin	10% -os jó minőségű szarvasmarha-szérumalbumin oldat Az egyszer tisztított fehérje kevesebb esélyt ad a keresztreakciókra a vizsgálati komponensekkel, mint a szérum- vagy tejoldatok	Használja foszfo-fehérjék célzásakor Legjobb az újrafelhasználott antitestek blokkolóban történő tárolásakor használni	PBS TBS
Blokkoló kazein	Tisztított kazein	Az egy fehérjét blokkoló puffer kevesebb esélyt ad a keresztreakciókra a vizsgálati komponensekkel, mint a szérum- vagy tejoldatok	Használja, ha a magas zsírtartalmú tej blokkolóknál magas a háttér	PBS TBS
Blokkoló BLOTTO	Zsírmentes száraz tej	Felhasználásra kész 5% -os zsírmentes tejpor oldat	Kényelem – használatra kész Következetesebb termék a házi blokkolókhoz képest	TBS
Fehérje-mentes	Nem fehérjét blokkoló vegyület	Minimalizálja vagy kiküszöböli a fehérjealapú blokkoló pufferekhez kapcsolódó keresztreaktivitást. A minta-antitest kombinációk megkövetelik az összes lehetséges exogén állati fehérje eliminálását a vizsgálati rendszerben, hogy elkerüljék a keresztreakciót vagy a kívánt próbafunkció kioltását.	Akkor használja, ha a fehérje-alapú blokkolók magas hátteret okoznak	PBS TBS PBST TBST
Pierce gyors blokkoló puffer	Egyetlen tisztított fehérje	5 perc alatt blokkol	Amikor az idő elengedhetetlen	TBS
SuperSignal Western Blot Enhancer	Membránkezelés alacsony bőségű vagy gyenge immunreaktivitású antitestek esetén	A nitrocellulóz membránok előkezelése Csökkenti a próbához szükséges primer antitest mennyiségét	Akkor használja, ha az elsődleges antitest 3–100-szor kevesebb primer antitestet tartalmaz, mint általában a kérdéses fehérje kimutatására	Használatra kész

 

 

A Western blotok eltávolítása és újbóli vizsgálata számos előnyt kínál:

1. Drága vagy csak korlátozott mennyiségben rendelkezésre álló minták megőrzése;
2. Egy adott blot elemzése több különböző antitest alkalmazásával, például altípus- vagy izoform-specifikus antitestek felhasználásával;
3. Az anomális eredmények újbóli elemzése és megerősítés ugyanazon vagy eltérő antitesttel;
4. Helytelen antitesttel történő inkubálás során fellépő hibák kijavítása;
5. Költségmegtakarítás a reagensekben és az időben ugyanazon blot újrafelhasználásával.

Számos protokollt tettek közzé az antitestek Western-blotokról való eltávolítására, beleértve azokat is, amelyek alacsony pH-t, hőt és detergenteket, valamint kaotrop szereket használnak. Három ajánlott protokollt mutatunk be alább. Az első bármely kemilumineszcens szubsztrátrendszerre alkalmazható, és detergens és hő kombinációját használja az antitestek felszabadítására. A másodikat általában olyan alkalmazásokban használják, ahol az antitesteket el kell választani egy antigéntől, és alacsony pH-értéket alkalmaznak, hogy az antitest szerkezetét oly módon változtassák meg, hogy a kötőhely már nem legyen aktív.

A harmadik protokoll a ReBlot ™ Plus Western Blot újrahasznosító készletet alkalmazza, amelyet kifejezetten az antitestek Western blot membránokról történő eltávolítására fejlesztettek ki. Ennek a megközelítésnek az előnyei a következők:

• A β-merkaptoetanolhoz kapcsolódó szagok elkerülése.
• Szobahőmérsékleten történő feldolgozás.
• Az antitestek eltávolítása 15 perc alatt.

Ezen módszerek egyike sem távolítja el a kromogén detektáló rendszerekből (például BCIP, 4CN, DAB és TMB) keletkező színes csapadékokat. Azonban továbbra is lehetséges a blot elemzése egy másik, más célfehérjére specifikus antitesttel.

Ezeket a protokollokat általában csak minőségi célokra szabad felhasználni, kivéve, ha bebizonyosodott, hogy a sztrippelés nem befolyásolja mennyiségileg az adott antigént. Az alkalmazott membrán módjától és típusától függően sok antigén ellenáll legalább 5 sztrippelési ciklusnak. Figyelembe kell venni azonban, hogy minden egyes sztrippelési ciklus során a membránnal immobilizált fehérjék kis részei eltávolodnak. Ha több antigént kell detektálni egymás után, akkor ajánlott olyan antigénekkel kezdeni, amelyek várhatóan alacsonyabb bőségben fordulnak elő, vagy kevesebb jelet eredményeznek.

Íme néhány további javaslat, amikor egy Western blot kísérletet terveznek egy vagy több forduló antitest sztrippeléssel.

• A PVDF membránok robusztusabbak, mint a nitrocellulóz, ezért minden olyan eljáráshoz ajánlott, amely antitest-sztrippelést tartalmaz.
• A PVDF membránok szárítása közvetlenül az SDS-PAGE gélről való átvitel után javítja a fehérjék membránhoz való kötődését, és különösen ajánlott, ha többszörös sztrippelést terveznek. A száraz PVDF membránokat alkoholral kell megnedvesíteni az immundetektálás első fordulója előtt.
• Először fedezze fel az alacsony bőségű antigéneket.
• Használjon alacsony affinitású antitesteket a nagy affinitású antitestek előtt.
• Fontos:  Bár a PVDF-blot szárítása ajánlott azonnal az átvitel után, a blotot nem szabad hagyni megszáradni az immundetektálási körök között. Bármely maradék antitestmolekula végleg kötődik a membránhoz, ha hagyják megszáradni.

 

Stripping Buffer
GR103020	Genorise Scientific	500 mL	EUR 89

WB Stripping Buffer
AR0153	BosterBio	100mL (for 10 assays for an 5 × 8.5cm blot)	EUR 133.2

West Ez Stripping Buffer
S2100-006	GenDepot	60ml	EUR 97.2

Microarray Stripping Buffer 1X
10250005-1	Bio-WORLD	25 mL	EUR 21.5

Microarray Stripping Buffer 1X
10250005-2	Bio-WORLD	100 mL	EUR 60.54

Nitrocellulose Stripping Buffer 10X
10750015-1	Bio-WORLD	250 mL	EUR 34.22

Nitrocellulose Stripping Buffer 10X
10750015-2	Bio-WORLD	500 mL	EUR 60.54

Blot Stripping Buffer 4X, pH 6.8
20960004-1	Bio-WORLD	250 mL	EUR 23.24

Blot Stripping Buffer 4X, pH 6.8
20960004-2	Bio-WORLD	500 mL	EUR 53.99

Tris-SDS Stripping Buffer, pH 6.8
20920002-1	Bio-WORLD	500 mL	EUR 24.17

Tris-SDS Stripping Buffer, pH 6.8
20920002-2	Bio-WORLD	1 L	EUR 36.14

Tris-SDS Stripping Buffer, pH 6.8
20920002-3	Bio-WORLD	4 L	EUR 115.76

Blot Stripping Buffer II 4X, pH 2.5
20960005-1	Bio-WORLD	250 mL	EUR 25.45

Blot Stripping Buffer II 4X, pH 2.5
20960005-2	Bio-WORLD	500 mL	EUR 42.24

West Ez Stripping Buffer, Economic Size
S2100-050	GenDepot	500ml	EUR 254.4

West Ez Stripping Buffer, Economic Size
S2100-100	GenDepot	2x500ml	EUR 336

Nylon Membrane Stripping Buffer 10X, Sterile
10750016-1	Bio-WORLD	250 mL	EUR 26.54
Description: Tris/EDTA/Denhardts (TE+Denhardts)

Nylon Membrane Stripping Buffer 10X, Sterile
10750016-2	Bio-WORLD	500 mL	EUR 59.21
Description: Tris/EDTA/Denhardts (TE+Denhardts)

Western blot recycling stripping buffer, 50 ml (10X)
90101	Alpha Diagnostics	50 ml	EUR 285.6

Phospho Antibody Stripping Solution
AKR-102	Cell Biolabs	1 kit	EUR 470.4
Description: This reagent allows you to strip phospho antibodies from protein blots and subsequently re-probe the same blot.

101Bio WB Stripping Solution
P5W3	101Bio	-	Ask for price

Dura Mater Stripping Forcep Angled
INS6134	Scientific Laboratory Supplies	EACH	EUR 112.8

Dura Mater Stripping Forcep Straight
INS6132	Scientific Laboratory Supplies	EACH	EUR 112.8

T-Pro Western Blot Stripping Reagent
JB11-K002	T-Pro Biotechnology	500ml/BT	EUR 213.6

Human IgG-RF stripper/Adsorbent (1 ml, sufficient for stripping 50 samples of 100 ul human serum/plasma)
RFS-1	Alpha Diagnostics	1 ml	EUR 123.6

100ML ProtoLift Western Strip Buffer
NAT1256	Scientific Laboratory Supplies	100ML	EUR 92.7

PhastGel SDS Buffer Strips pack of 10
17051601	Scientific Laboratory Supplies	EACH	EUR 116.28

PhastGel Native Buffer Strips pack of 10
17051701	Scientific Laboratory Supplies	EACH	EUR 116.28