termékleírás

A BrdU sejtproliferációs assay készlet egy 5-bróm-2′-dezoxiuridint (BrdU) detektál a sejt DNS-be a sejtproliferáció során anti-BrdU antitest alkalmazásával. Amikor a sejteket BrdU-t tartalmazó jelölőközeggel tenyésztjük, ez a pirimidin-analóg beépül a timidin helyett a proliferáló sejtek újonnan szintetizált DNS-ébe.

A jelölő közeg eltávolítása után a sejteket rögzítjük, és a DNS-t rögzítő / denaturáló oldatunkkal denaturáljuk. Ezután BrdU egér mAb-t adunk a beépített BrdU kimutatására (A DNS denaturálása szükséges a beépített BrdU hozzáférhetőségének javításához a detektáló antitesthez). Ezután anti-egér IgG, HRP-hez kapcsolt antitestet használunk a kötött detektáló antitest felismerésére. HRP szubsztrát TMB-t adunk a szín kialakításához. A kifejlődött szín abszorbancájának nagysága arányos a sejtekbe beépített BrdU mennyiségével, ami közvetlenül jelzi a sejtproliferációt.

A termék tartalmazza	Mennyiség (gróffal)	Megoldás színe
BrdU	1 x 150 µl
Javító / denaturáló megoldás	2 x 25 ml
BrdU egérdetektáló mAb	1 x 500 µl	Zöld
Anti-egér IgG, HRP-hez kapcsolt antitest	1 x 500 µl	Piros
Detektáló antitest hígító	1 x 50 ml	Zöld
HRP hígító	1 x 50 ml	Piros
20x mosópuffer	1 x 50 ml
TMB 7004 szubsztrátum	1 x 50 ml
STOP megoldás 7002	2 x 25 ml

 

Háttér

A halogénezett nukleotidok, például a pirimidin-analóg bromodeoxiuridin (BrdU) hasznosak az élő sejtekben és szövetekben kialakulóban lévő DNS-ek jelölésére. A BrdU beépül a timidin helyett a DNS replikálódásába, és a későbbi BrdU immundetektálása specifikus monoklonális antitestek alkalmazásával lehetővé teszi a sejtek jelölését a sejtciklus S fázisában. Miután a sejteket vagy szöveteket bróm-dezoxiuridinnal jelöltük, BrdU (Bu20a) egér mAb-vel fel lehet használni az egyszálú DNS-be beépített BrdU kimutatását.

Főbb jellemzők és részletek

• Érzékenység: 40 sejt / kút
• Mintatípus: Adherens sejtek, Szuszpenziós sejtek
• Detektálási módszer: kolorimetrikus
• Vizsgálat típusa: szendvics (kvalitatív)

Az 5-bróm-2-dezoxiuridin (BrdU) egy pirimidin-analóg. A timidin helyett beépül a szaporodó sejtek újonnan szintetizált DNS-ébe. A Biovision BrdU sejtproliferációs vizsgálati készlete egér anti-BrdU antitest segítségével detektálja a beépült BrdU-t. Anti-egér HRP-hez kapcsolt másodlagos antitestet használunk a BrdU-hoz kötött anti-BrdU antitest kimutatására, amelyet TMB (HRP szubsztrát) hozzáadása követ. A színfejlődés mértéke arányos a sejtekbe beépített BrdU mennyiségével, és közvetlenül felhasználható a sejtproliferáció indikátoraként. A többi sejtproliferációs vizsgálathoz képest ez a készlet csak a szaporodó sejteket detektálja, a beoltott sejteket nem. Ez a rendkívül érzékeny, nem radioaktív készlet kevesebb, mint 50-100 szaporodó sejtet észlel.

METABOLIKUS SZaporítás Tesztek

A metabolikus aktivitást mérő vizsgálatok alkalmasak a proliferáció, az életképesség és a citotoxicitás elemzésére. A tetrazóliumsók, például az MTT, az XTT és a WST-1 redukálása színes formazán-vegyületekké vagy a resazurin bioredukciója csak metabolikusan aktív sejtekben történik. Az aktívan szaporodó sejtek fokozzák metabolikus aktivitásukat, míg a toxinoknak kitett sejtek aktivitása csökken.

MTT sejtproliferációs vizsgálatok

Az MTT (3- [4,5-dimetil-tiazol-2-il] -2,5-difeniltetrazolium-bromid; tiazolil-kék) egy vízben oldódó tetrazóliumsó, amely sárgás színű oldatot eredményez, ha táptalajban vagy fenolpirostól mentes sóoldatokban állítják elő. Az oldott MTT-t oldhatatlan lila formazánná alakítják át a tetrazólium gyűrű dehidrogenáz enzimekkel történő hasításával. Ezt a vízben oldhatatlan formazánt izopropanol vagy más oldószerek alkalmazásával oldhatjuk, és az oldott anyagot spektrofotometriásan mérjük az abszorbancia alkalmazásával az átalakított festék koncentrációjának függvényében.

 

XTT sejtproliferációs vizsgálatok

Az MTT-vel ellentétben az XTT hasítási terméke vízben oldódik; szolubilizálási lépés tehát nem szükséges. Az XTT tetrazóliumsót komplex sejtszerkezettel hasítják formazánra. Ez a bioredukció csak életképes sejtekben fordul elő, és összefügg a NAD (P) H termelésével glikolízissel. A képződött formazan festék mennyisége közvetlenül korrelál a tenyészet metabolikusan aktív sejtjeinek számával.

WST-1 sejtproliferációs vizsgálatok

A stabil tetrazóliumsót, a WST-1-et oldható formazánra hasítják egy komplex sejtmechanizmus segítségével, amely elsősorban a sejt felszínén fordul elő. Ez a bioredukció nagymértékben függ az életképes sejtekben a NAD (P) H glikolitikus termelésétől. A képződött formazan festék mennyisége közvetlenül korrelál a tenyészet metabolikusan aktív sejtjeinek számával.

 

 

 

 

BrdU Cell Proliferation Assay Kit
C0300-100	GenDepot	1000 Assays	EUR 1574.4

BrdU Cell Proliferation Assay Kit
C0300-500	GenDepot	5000 Assays	EUR 5325.6

BrdU Cell Proliferation Assay Kit
K306-1000	Biovision	each	EUR 1168.8

BrdU Cell Proliferation Assay Kit
K306-200	Biovision	each	EUR 470.4

CytoSelect BrdU Competitive ELISA Kit
CBA-5098	Cell Biolabs	96 assays	EUR 651.6

Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody
BNC942888-100	Biotium	100uL	EUR 279.6
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF594 conjugate, Concentration: 0.1mg/mL

Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody
BNC942888-500	Biotium	500uL	EUR 654
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF594 conjugate, Concentration: 0.1mg/mL

Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody
BNCA2888-250	Biotium	250uL	EUR 472.8
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), APC conjugate, Concentration: 0.1mg/mL

Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody
BNC552888-100	Biotium	100uL	EUR 279.6
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF555 conjugate, Concentration: 0.1mg/mL

Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody
BNC552888-500	Biotium	500uL	EUR 654
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF555 conjugate, Concentration: 0.1mg/mL

Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody
BNC612888-100	Biotium	100uL	EUR 279.6
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF660R conjugate, Concentration: 0.1mg/mL

Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody
BNC612888-500	Biotium	500uL	EUR 654
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF660R conjugate, Concentration: 0.1mg/mL

Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody
BNCP2888-250	Biotium	250uL	EUR 472.8
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), PerCP conjugate, Concentration: 0.1mg/mL

Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody
BNCR2888-250	Biotium	250uL	EUR 472.8
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), RPE conjugate, Concentration: 0.1mg/mL

Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody
BNC402888-100	Biotium	100uL	EUR 279.6
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF640R conjugate, Concentration: 0.1mg/mL

Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody
BNC402888-500	Biotium	500uL	EUR 654
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF640R conjugate, Concentration: 0.1mg/mL

Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody
BNC432888-100	Biotium	100uL	EUR 279.6
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF543 conjugate, Concentration: 0.1mg/mL