termékleírás
A BrdU sejtproliferációs assay készlet egy 5-bróm-2′-dezoxiuridint (BrdU) detektál a sejt DNS-be a sejtproliferáció során anti-BrdU antitest alkalmazásával. Amikor a sejteket BrdU-t tartalmazó jelölőközeggel tenyésztjük, ez a pirimidin-analóg beépül a timidin helyett a proliferáló sejtek újonnan szintetizált DNS-ébe.
A jelölő közeg eltávolítása után a sejteket rögzítjük, és a DNS-t rögzítő / denaturáló oldatunkkal denaturáljuk. Ezután BrdU egér mAb-t adunk a beépített BrdU kimutatására (A DNS denaturálása szükséges a beépített BrdU hozzáférhetőségének javításához a detektáló antitesthez). Ezután anti-egér IgG, HRP-hez kapcsolt antitestet használunk a kötött detektáló antitest felismerésére. HRP szubsztrát TMB-t adunk a szín kialakításához. A kifejlődött szín abszorbancájának nagysága arányos a sejtekbe beépített BrdU mennyiségével, ami közvetlenül jelzi a sejtproliferációt.
A termék tartalmazza | Mennyiség (gróffal) | Megoldás színe | |||
---|---|---|---|---|---|
BrdU | 1 x 150 µl | ||||
Javító / denaturáló megoldás | 2 x 25 ml | ||||
BrdU egérdetektáló mAb | 1 x 500 µl | Zöld | |||
Anti-egér IgG, HRP-hez kapcsolt antitest | 1 x 500 µl | Piros | |||
Detektáló antitest hígító | 1 x 50 ml | Zöld | |||
HRP hígító | 1 x 50 ml | Piros | |||
20x mosópuffer | 1 x 50 ml | ||||
TMB 7004 szubsztrátum | 1 x 50 ml | ||||
STOP megoldás 7002 | 2 x 25 ml |
Háttér
A halogénezett nukleotidok, például a pirimidin-analóg bromodeoxiuridin (BrdU) hasznosak az élő sejtekben és szövetekben kialakulóban lévő DNS-ek jelölésére. A BrdU beépül a timidin helyett a DNS replikálódásába, és a későbbi BrdU immundetektálása specifikus monoklonális antitestek alkalmazásával lehetővé teszi a sejtek jelölését a sejtciklus S fázisában. Miután a sejteket vagy szöveteket bróm-dezoxiuridinnal jelöltük, BrdU (Bu20a) egér mAb-vel fel lehet használni az egyszálú DNS-be beépített BrdU kimutatását.
Főbb jellemzők és részletek
- Érzékenység: 40 sejt / kút
- Mintatípus: Adherens sejtek, Szuszpenziós sejtek
- Detektálási módszer: kolorimetrikus
- Vizsgálat típusa: szendvics (kvalitatív)
Az 5-bróm-2-dezoxiuridin (BrdU) egy pirimidin-analóg. A timidin helyett beépül a szaporodó sejtek újonnan szintetizált DNS-ébe. A Biovision BrdU sejtproliferációs vizsgálati készlete egér anti-BrdU antitest segítségével detektálja a beépült BrdU-t. Anti-egér HRP-hez kapcsolt másodlagos antitestet használunk a BrdU-hoz kötött anti-BrdU antitest kimutatására, amelyet TMB (HRP szubsztrát) hozzáadása követ. A színfejlődés mértéke arányos a sejtekbe beépített BrdU mennyiségével, és közvetlenül felhasználható a sejtproliferáció indikátoraként. A többi sejtproliferációs vizsgálathoz képest ez a készlet csak a szaporodó sejteket detektálja, a beoltott sejteket nem. Ez a rendkívül érzékeny, nem radioaktív készlet kevesebb, mint 50-100 szaporodó sejtet észlel.

METABOLIKUS SZaporítás Tesztek
A metabolikus aktivitást mérő vizsgálatok alkalmasak a proliferáció, az életképesség és a citotoxicitás elemzésére. A tetrazóliumsók, például az MTT, az XTT és a WST-1 redukálása színes formazán-vegyületekké vagy a resazurin bioredukciója csak metabolikusan aktív sejtekben történik. Az aktívan szaporodó sejtek fokozzák metabolikus aktivitásukat, míg a toxinoknak kitett sejtek aktivitása csökken.
MTT sejtproliferációs vizsgálatok
Az MTT (3- [4,5-dimetil-tiazol-2-il] -2,5-difeniltetrazolium-bromid; tiazolil-kék) egy vízben oldódó tetrazóliumsó, amely sárgás színű oldatot eredményez, ha táptalajban vagy fenolpirostól mentes sóoldatokban állítják elő. Az oldott MTT-t oldhatatlan lila formazánná alakítják át a tetrazólium gyűrű dehidrogenáz enzimekkel történő hasításával. Ezt a vízben oldhatatlan formazánt izopropanol vagy más oldószerek alkalmazásával oldhatjuk, és az oldott anyagot spektrofotometriásan mérjük az abszorbancia alkalmazásával az átalakított festék koncentrációjának függvényében.

XTT sejtproliferációs vizsgálatok
Az MTT-vel ellentétben az XTT hasítási terméke vízben oldódik; szolubilizálási lépés tehát nem szükséges. Az XTT tetrazóliumsót komplex sejtszerkezettel hasítják formazánra. Ez a bioredukció csak életképes sejtekben fordul elő, és összefügg a NAD (P) H termelésével glikolízissel. A képződött formazan festék mennyisége közvetlenül korrelál a tenyészet metabolikusan aktív sejtjeinek számával.
WST-1 sejtproliferációs vizsgálatok
A stabil tetrazóliumsót, a WST-1-et oldható formazánra hasítják egy komplex sejtmechanizmus segítségével, amely elsősorban a sejt felszínén fordul elő. Ez a bioredukció nagymértékben függ az életképes sejtekben a NAD (P) H glikolitikus termelésétől. A képződött formazan festék mennyisége közvetlenül korrelál a tenyészet metabolikusan aktív sejtjeinek számával.
BrdU Cell Proliferation Assay Kit |
|||
C0300-100 | GenDepot | 1000 Assays | EUR 1574.4 |
BrdU Cell Proliferation Assay Kit |
|||
C0300-500 | GenDepot | 5000 Assays | EUR 5325.6 |
BrdU Cell Proliferation Assay Kit |
|||
K306-1000 | Biovision | each | EUR 1168.8 |
BrdU Cell Proliferation Assay Kit |
|||
K306-200 | Biovision | each | EUR 470.4 |
CytoSelect BrdU Competitive ELISA Kit |
|||
CBA-5098 | Cell Biolabs | 96 assays | EUR 651.6 |
Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody |
|||
BNC942888-100 | Biotium | 100uL | EUR 279.6 |
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF594 conjugate, Concentration: 0.1mg/mL |
Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody |
|||
BNC942888-500 | Biotium | 500uL | EUR 654 |
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF594 conjugate, Concentration: 0.1mg/mL |
Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody |
|||
BNCA2888-250 | Biotium | 250uL | EUR 472.8 |
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), APC conjugate, Concentration: 0.1mg/mL |
Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody |
|||
BNC552888-100 | Biotium | 100uL | EUR 279.6 |
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF555 conjugate, Concentration: 0.1mg/mL |
Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody |
|||
BNC552888-500 | Biotium | 500uL | EUR 654 |
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF555 conjugate, Concentration: 0.1mg/mL |
Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody |
|||
BNC612888-100 | Biotium | 100uL | EUR 279.6 |
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF660R conjugate, Concentration: 0.1mg/mL |
Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody |
|||
BNC612888-500 | Biotium | 500uL | EUR 654 |
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF660R conjugate, Concentration: 0.1mg/mL |
Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody |
|||
BNCP2888-250 | Biotium | 250uL | EUR 472.8 |
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), PerCP conjugate, Concentration: 0.1mg/mL |
Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody |
|||
BNCR2888-250 | Biotium | 250uL | EUR 472.8 |
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), RPE conjugate, Concentration: 0.1mg/mL |
Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody |
|||
BNC402888-100 | Biotium | 100uL | EUR 279.6 |
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF640R conjugate, Concentration: 0.1mg/mL |
Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody |
|||
BNC402888-500 | Biotium | 500uL | EUR 654 |
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF640R conjugate, Concentration: 0.1mg/mL |
Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R) Antibody |
|||
BNC432888-100 | Biotium | 100uL | EUR 279.6 |
Description: Primary antibody against Bromodeoxyuridine (BrdU) (Proliferation Marker) (BRD2888R), CF543 conjugate, Concentration: 0.1mg/mL |