A PMA (propidium-monoazid) egy foto-reaktív DNS-kötő festék, amelyet mikroorganizmusok, például baktériumok, vírusok és gombák életképességének PCR-jében (v-PCR) használnak. A PMA 1 mg liofilizált szilárd anyagként vagy 20 mM vízoldatban kapható. Próbálja ki a PMAxx (40069), a PMA kiváló alternatíváját is.
Szelektíven detektálja az életképes sejteket qPCR segítségével
Több száz kiadványban érvényesítették
Az elhalt sejt specifikus festék, kötődik a DNS-hez
A fotoaktiválás után kovalensen kötődik a DNS-hez
1 mg liofilizált szilárd anyag vagy 20 mM vízoldat formájában kapható
Ha többet szeretne megtudni a mikrobiális vagy sejt életképesség meghatározásának előnyeiről az életképesség PCR segítségével, látogassa meg a Vability PCR Technology oldalt.
Termék
Katalógus szám
Egységméret
Formátum
PMA festék
40013
1 mg
Liofilizált szilárd anyag
PMA festék, 20 mM vízben
40019
100 uL (20 mM vízben)
Megoldás
pma-propidium-monoazide
A PMA-ról
A PMA festék egy DNS-módosító, amelyet a Biotium tudósai találtak ki. Ez egy foto-reaktív festék, amely nagy affinitással kötődik a DNS-hez. A látható fénnyel végzett fotolízis során a PMA festék kovalensen kapcsolódik a DNS-hez. Ez a módosított DNS nem amplifikálható PCR-rel. A festéket úgy tervezték, hogy sejthártya-át nem eresztő legyen. Az élő és elhalt sejtek populációjában tehát csak az elhalt sejtek hajlamosak a DNS-módosításra a sérült sejtmembránok miatt. A PMA festék ezen egyedülálló tulajdonsága miatt rendkívül hasznos az élő baktériumok qPCR általi szelektív detektálásában.
Amióta a Biotium először kifejlesztette a PMA festéket, több száz publikáció jelent meg a festék felhasználásáról számos mintatípusban, beleértve a baktériumtörzsek, biofilmek, élesztő, gombák, vírusok és eukarióta sejtek tucatjait. Olyan alkalmazásokban alkalmazták, mint az élelmiszer- és vízbiztonság, valamint a környezeti vizsgálatok, valamint a qPCR, a NextGen Sequencing (NGS), a Sanger szekvenálás és a Loop-mediated Isothermal Amplification (LAMP) kapcsán.
A PMAxx technológiára adott és / vagy függőben lévő amerikai és nemzetközi szabadalmak vonatkoznak.
Absztrakt
A propidium-monoazid (PMA) egy nagyon szelektív festék, amely csak a membrán által károsodott, elhalt mikrobiális sejtekbe hatol be, és gátolja mind a DNS kivonását, mind az amplifikációját. A PMA-t széles körben alkalmazták az élő és az elhalt mikrobiális sejtek megkülönböztetésére; a PMA alkalmazása fitoplankton vizsgálatokban azonban korlátozott volt. Ebben a tanulmányban megkíséreltük értékelni annak alkalmazhatóságát az életképes fitoplankton megkülönböztetésére. Hét fitoplankton fajon, a Microcystis aeruginosa , Anabaena sp., Aphanizomenon sp., Synechocystis sp., Cryptomonas ovata , Scenedesmus obliquus és Nitzschia apiculata növényfajokon teszteltük a PMA-t . a fő fitoplankton taxonok, a Cyanobacteria (első négy faj), a Chlorophyta, a Cryptophyta és a Bacillariophyta képviselőiként. Eredményeink azt mutatták, hogy a PMA alkalmazása édesvízben élő fitoplanktonra megkülönbözteti az életképes és az elhalt sejteket, mint a mikrobiológiai vizsgálatokban. Kísérleti körülményeink szerint a PMA inkább a cianobaktérium fajokban élő holt sejtektől differenciálódott, mint más fitoplankton taxonokban. Eredményeink azonban azt is megmutatták, hogy szükség lehet a PMA kezelés hatékonyságát befolyásoló különféle feltételek kiigazítására annak érdekében, hogy kiterjesszék alkalmazhatóságát más fitoplanktonokra. Bár a PMA hatásához hozzájáruló összes tényezőt nem sikerült értékelni, tanulmányunk kimutatta a PMA-alapú molekuláris megközelítések alkalmazhatóságát, amely kényelmes kvantitatív módszer lehet az édesvízi ökoszisztémákban az élet és az elhalt fitoplankton megkülönböztetésére. Optimális kezelési feltételek meghatározása más fitoplankton fajok számára növelheti a PMA-alapú molekuláris megközelítések hatékonyságát.
